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徠卡共聚焦顯微鏡中細(xì)胞生物學(xué)功能

更新時(shí)間:2013-09-03   點(diǎn)擊次數(shù):1648次

徠卡共聚焦顯微鏡中細(xì)胞生物學(xué)功能

1.粘附細(xì)胞的分選:Meridian公司生產(chǎn)的ultMa型徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡成侶儀是目前世界上*能對粘附細(xì)胞進(jìn)行分選的儀器,而這種不改變細(xì)胞周圍培養(yǎng)環(huán)境、細(xì)胞鋪展程度相生長狀態(tài)的分選方式是至關(guān)重要的。它有兩種方式:一種是燦1ahon方式,另一種是CookieCM小。8方式。

AN川on方式原理是;在特制的培養(yǎng)皿上有兩類細(xì)胞,一類是未作熒光染色的細(xì)胞群,另一類是作熒光染色的細(xì)胞群,利用高能激光把染色的細(xì)胞群殺死,而把末染色的細(xì)胞群保留并且繼續(xù)培養(yǎng).這種方式適用于數(shù)量較多細(xì)胞的分選。

Co‘,k;eCMuinR方式原理是:利用高能量激光:F底部帶膜的特制培養(yǎng)皿上在欲選細(xì)胞周圍切割成八角形,而非選細(xì)胞則因在該幾何形狀之外而被除去,它適用于選擇數(shù)量較少的突變細(xì)胞、轉(zhuǎn)移細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞。

基于這兩種方法,徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡能夠做到:⑦總體掃描細(xì)胞群;⑦根據(jù)細(xì)胞

物理和少化特性進(jìn)行分選;②對以百力分之‘機(jī)率發(fā)生的突變細(xì)胞進(jìn)行篩選;①不改變

細(xì)胞形態(tài)、類型和活性而克隆細(xì)胞;、員分離細(xì)胞亞群以進(jìn)行定量熒光分析;⑥自動(dòng)儲(chǔ)分細(xì)胞位迎,以對待定細(xì)胞進(jìn)行重復(fù)測定。

2.激光細(xì)胞顯微外科及光陷阱技術(shù):激光掃描共聚焦顯微鏡可將激光作“光子刀”使用,以完成細(xì)腦膜瞬間穿孔,線粒體、溶酶體等細(xì)胞器燒灼,染色體切割、神經(jīng)元突起切除等一系列細(xì)胞外科于術(shù)。

光陷阱(opticnltr,p)技術(shù)是利用激光的力學(xué)效應(yīng),將一個(gè)微米級大小的細(xì)胞器或其以村6鉗制于激光束的焦平面,也可稱為光鉗。可利用光鉗技術(shù)來移動(dòng)拙胞的微小別粘和結(jié)構(gòu)(如染色體、細(xì)胞器)、進(jìn)行細(xì)胞融合、機(jī)械刺激及細(xì)胞骨架彈性測址等。

3.熒光光漂白恢復(fù)(FR八P)技術(shù):此技術(shù)借助于高強(qiáng)度脈沖式激光照射細(xì)胞的某一區(qū)域,從而造成該區(qū)域熒光分子的光淬火,該區(qū)域周圍州F淬滅熒光分子將以一定速率向受照區(qū)域擴(kuò)散,用激光掃描共聚焦顯微鏡可邑接對此擴(kuò)散速率進(jìn)行監(jiān)測.由此揭示細(xì)胞結(jié)構(gòu)和各種變化的機(jī)制,因而可用以研究細(xì)胞骨架構(gòu)成、核膜結(jié)構(gòu)和大分子組裝等。

4.胞間通訊的研究:動(dòng)物細(xì)胞中縫隙連接介導(dǎo)的胞間通訊被認(rèn)為在細(xì)胞增殖和分化中起著非常重要的作用。徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡通過測量細(xì)胞縫隙連接介導(dǎo)的分子轉(zhuǎn)移,觀察相鄰細(xì)胞之間的胞間通訊。可用于研先腫瘤啟動(dòng)因子、生長因子以及細(xì)胞內(nèi)物”、pH相cAMP對縫隙連接祁胞間通訊的影響。

5.細(xì)胞膜流動(dòng)性測定:細(xì)胞膜熒光探針受到極化光線激發(fā)后,其發(fā)射光極性依賴于熒光分子的旋轉(zhuǎn),而這種有序的運(yùn)動(dòng)自由度依賴于熒光分子周圍的膜流動(dòng)性,故極性測員叮間接反映細(xì)胞膜的流動(dòng)件。因此,通過計(jì)算機(jī)軟件,徠卡激光掃描共聚焦顯微鏡可對細(xì)胞膜的流動(dòng)性進(jìn)行定量和定性分析。這種膜流動(dòng)件測定在膜的磷脂酸織成分析、藥物效應(yīng)和作用位點(diǎn)、溫度反應(yīng)測定及物種比較等方面有重要作用。

備注:徠卡共聚焦顯微鏡中細(xì)胞生物學(xué)功能部分文章由北京中儀光科科技有限公司編輯整理上傳。

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